I biglietti ferroviari si possono acquistare presso gli sportelli delle biglietterie di stazione negli orari di apertura oppure utilizzando biglietterie automatiche e postazioni self-service presenti in molte stazioni. E' inoltre possibile acquistare abbonamenti e biglietti on-line, tramite il sito internet di Trenitalia.

Di regola, i biglietti scadono due mesi dopo la data di emissione, tranne i biglietti a fasce chilometriche ed a tagliandi autoadesivi che non hanno alcuna scadenza e  i biglietti  acquistati e stampati on-line, che possono essere acquistati con un anticipo di 7 giorni sulla data di partenza.

Di regola, la validità oraria del biglietto decorre dal momento della convalida mediante le macchinette obliteratrici di stazione. Il viaggio deve concludersi entro 24 ore dall’ora della convalida (in Trentino entro le ore 24.00 del giorno di emissione). Per percorrenze fino a 200 Km il viaggio deve essere terminato entro 6 ore dall’ora della convalida (in Lombardia entro 3 ore, per percorrenze fino a 50 Km).  I biglietti per viaggi sui treni del trasporto regionale con origine in una regione e destinazione in un’altra sono validi per 6 ore dal momento della convalida.

I biglietti  regionali acquistati e stampati via internet sono già convalidati con la data e l'ora di partenza richieste dal cliente e hanno una validità di quattro ore. Il viaggiatore che si trovi in treno allo scadere del termine di validità del biglietto può proseguire il viaggio già iniziato fino alla stazione di destinazione, senza effettuare fermate intermedie.

In  treno occorre salire con un biglietto valido per il viaggio che si vuole effettuare e convalidato nei casi in cui è richiesta questa formalità. Non è più consentito chiedere a bordo treno l'acquisto o la convalida dei biglietti.

Il viaggiatore sprovvisto di biglietto o con biglietto non convalidato viene regolarizzato con il pagamento dell'importo del biglietto a prezzo intero e l'applicazione di una sanzione di 50,00 Euro se il viaggiatore si presta al pagamento immediato delle somme dovute al personale del treno o presso la biglietteria abilitata* all’arrivo del treno nella stazione; 100,00 Euro se il pagamento è effettuato entro il 15° giorno dalla data della notifica; 200,00 Euro dal 16° giorno.

La stessa sanzione si applica nel caso di viaggiatore in possesso di biglietto elettronico regionale (acquistato su questo sito e stampato dal proprio pc) che non sia in grado di presentare un valido documento di identità.
 Il viaggiatore  in possesso di un biglietto non valido per il treno o il servizio che intende utilizzare (biglietto emesso per una categoria di treno diversa, ad una tariffa diversa da quella spettante, ecc.) viene regolarizzato con il pagamento della differenza dovuta a prezzo intero e l'applicazione di un sovrapprezzo di 8 euro.

Il viaggiatore può continuare a richiedere a bordo l'acquisto, la convalida o l'assegnazione del posto senza alcuna regolarizzazione nei seguenti casi:


*Nel caso in cui la biglietteria sia chiusa o non funzionante, il viaggiatore può effettuare il pagamento di quanto dovuto, entro i tre giorni successivi alla contestazione, presso qualsiasi biglietteria abilitata o utilizzando l’apposito conto corrente  

La Legge n.59/97, ("Bassanini"), ha previsto il conferimento alle Regioni della responsabilità di programmazione e finanziamento di tutti i servizi di trasporto pubblico locali per giungere ad una integrazione tra le differenti modalità di trasporto presenti nel territorio ed eliminare le sovrapposizioni e le tariffe difformi. 
In coerenza con tale obiettivo sono state introdotte da ogni Direzione Regionale/Provinciale di Trenitalia distinte tariffe di corsa semplice e abbonamento valide per gli spostamenti sui treni del Trasporto Regionale e sugli Espressi nell'ambito del proprio territorio, equiparabili a quelle presenti nel mercato di riferimento. 
Per viaggi sui treni del trasporto regionale che interessano più regioni saranno applicate, in proporzione alle tratte di competenza, le tariffe previste dalle relative Regioni.

Esistono diverse tariffe nazionali, distinte per tipologia di treno, che si applicano per tutti i viaggi extraregionali, effettuati senza l’utilizzo di treni del trasporto regionale. Di regola sono calcolate su base.chilometrica, ma per alcuni servizi, come quelli assicurati dagli Eurostar e dagli Intercity, tengono conto di altri parametri legati alla domanda e alla qualità del viaggio.